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自動(dòng)稀釋AccuSizer? SPOS 系統(tǒng)

自動(dòng)稀釋AccuSizer? SPOS 系統(tǒng)
上海奧法美嘉生物科技有限公司  2023-11-28  |  閱讀:1461

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本文檔中描述的自動(dòng)稀釋系統(tǒng)包括輸入、輸出、稀釋室、樣品和稀釋劑。將已知數(shù)量的樣品注入稀釋室。過(guò)濾后的稀釋液流入稀釋室,與樣品混合,并不斷稀釋。然后,稀釋后的樣品從稀釋室流出,流經(jīng)傳感器進(jìn)行粒徑和計(jì)數(shù)分析。


關(guān)鍵詞:自動(dòng)稀釋;AccuSizer系統(tǒng);樣品稀釋


1 自動(dòng)稀釋的工作原理

本文檔中描述的自動(dòng)稀釋系統(tǒng)包括輸入、輸出、稀釋室、樣品和稀釋劑。將已知數(shù)量的樣品注入稀釋室。過(guò)濾后的稀釋液流入稀釋室,與樣品混合,并不斷稀釋。然后,稀釋后的樣品從稀釋室流出,流經(jīng)傳感器進(jìn)行粒徑和計(jì)數(shù)分析。


2 一步自動(dòng)稀釋

一步自動(dòng)稀釋使用少量濃縮樣品懸浮液,將其添加到“稀釋室”中,“稀釋室”中裝有給定體積的清潔(過(guò)濾)稀釋液,得到稀釋樣品懸浮液的體積 V。通過(guò)已知固定流速的潔凈的稀釋劑流入稀釋室并持續(xù)攪拌的方式,對(duì)得到的稀釋樣品懸浮液進(jìn)一步稀釋?zhuān)♂屢旱牧魉偈荈。進(jìn)一步稀釋后的樣品懸浮液被迫以相同的流速離開(kāi)稀釋室,使其通過(guò)SPOS傳感器并進(jìn)行分析。離開(kāi)稀釋室的樣品流體中的顆粒濃度隨時(shí)間不斷下降。當(dāng)顆粒濃度低于適當(dāng)?shù)念A(yù)設(shè)值時(shí),開(kāi)始分析樣品懸浮液。


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圖 1. 自動(dòng)稀釋系統(tǒng)(一步“連續(xù)衰減”稀釋?zhuān)┑暮?jiǎn)化示意圖,包括可選的樣品捕獲/進(jìn)樣閥。


過(guò)濾后的稀釋劑首先流經(jīng)稀釋室并進(jìn)行計(jì)數(shù),以確保在可接受的背景計(jì)數(shù)水平?!翱山邮堋敝等Q于具體的粒徑應(yīng)用和起始粒徑閾值直徑 d0(即要測(cè)量的最小粒徑)。為確定稀釋樣品懸浮液的背景濃度和粒徑分布 PSD 而選擇的流速通常為 60 mL/min。在“快速?zèng)_洗”模式下,F(xiàn) 值可以增加到 100 – 150 mL/min,以加快沖洗稀釋室和相關(guān)流體的過(guò)程。當(dāng)背景顆粒濃度低于指示值時(shí),沖洗停止,系統(tǒng)即可進(jìn)行自動(dòng)樣品稀釋。


將適量(通常為25μL至1mL)的濃縮樣品懸浮液注入稀釋室中的稀釋液中。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室版的 AccuSizer? AD 系統(tǒng),進(jìn)樣是通過(guò)側(cè)端口將所需體積的樣品懸浮液直接移液到稀釋室中來(lái)完成的。在改進(jìn)的 AccuSizer AD 系統(tǒng)中,包含樣品進(jìn)樣注射閥(如圖 1 所示),通過(guò)閥門(mén)的驅(qū)動(dòng),將“樣品定量環(huán)”中捕獲的樣品懸浮液機(jī)械地注入稀釋液流路中。該動(dòng)作使捕獲體積的樣品懸浮液通過(guò)新鮮稀釋液的流動(dòng)快速注入稀釋室中,并不斷攪拌。


通過(guò)以指定的流速連續(xù)向稀釋室中加入新鮮稀釋劑來(lái)實(shí)現(xiàn)駐留在稀釋室中的顆粒懸浮液的自動(dòng)稀釋?zhuān)鐖D 1 所示。濃縮樣品懸浮液完全注入稀釋室的時(shí)間定義為 t = 0。在稀釋室的溶液中不斷加入新鮮的稀釋液,使稀釋后的樣品懸浮液以相同的流速離開(kāi)稀釋液進(jìn)入SPOS傳感器,懸浮液中的顆粒濃度按指數(shù)定律及時(shí)連續(xù)衰減,


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其中t是稀釋室的"停留時(shí)間",由下式給出:


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樣品流體中顆粒濃度從腔室流出并通過(guò)傳感器的時(shí)間行為如圖 2 所示。


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圖2.一步自動(dòng)稀釋的稀釋樣品懸浮液中離開(kāi)稀釋室的顆粒濃度 C(t) 與時(shí)間 (t) 的關(guān)系圖。


當(dāng)顆粒濃度低于所需的目標(biāo)值 CT 時(shí),數(shù)據(jù)收集會(huì)在指定的時(shí)間長(zhǎng)度 T 內(nèi)自動(dòng)開(kāi)始。該時(shí)間定義為時(shí)間 t = t1。數(shù)據(jù)收集在時(shí)間 t = t1 + T(定義為 t2)結(jié)束。在數(shù)據(jù)收集時(shí)間 T 期間測(cè)量的粒子數(shù),從 t = t1 到 t = t2,定義為 DN2。該數(shù)量必須乘以計(jì)算出的“稀釋因子”DF,以獲得最初在稀釋開(kāi)始時(shí)注入稀釋室的樣品顆??倲?shù)N0的估計(jì)值。DF 的表達(dá)式由下式給出,


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對(duì)于典型應(yīng)用,進(jìn)樣后的樣品懸浮液過(guò)濃縮(即 C0 > CT),可以通過(guò)求解項(xiàng) exp(t1/t) 來(lái)重寫(xiě)公式 5,認(rèn)識(shí)到 C(t1) = CT


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因此,


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根據(jù)定義,在 T 期間測(cè)量的粒子數(shù) DN2 由 N0/DF 給出。從等式 7 可以看出,


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在進(jìn)樣后的樣品懸浮液濃度不足(即 C0 ≤ CT)的情況下,t1 = 0 稀釋因子DF的表達(dá)式很簡(jiǎn)單:


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在時(shí)間 T 期間測(cè)量的粒子數(shù) DN2 再次由 N0/DF 給出。在本例中,使用公式 9,DN2 的表達(dá)式變?yōu)?,


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在進(jìn)樣后的樣品懸浮液濃度不足(即 C0 ≤ CT)的情況下,t1 = 0。稀釋因子DF的表達(dá)式很簡(jiǎn)單,


微信圖片_20231128084905.png

在時(shí)間 T 期間測(cè)量的粒子數(shù) DN2 再次由 N0/DF 給出。在這種情況下,使用公式 (9),DN2 的表達(dá)式變?yōu)?,

微信圖片_20231128084908.png

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